目前,農(nóng)藥殘留快速檢測方法很多,按分類可分為生化檢測法和色譜快速檢測法。生化檢測法中又以酶抑制法應(yīng)用最為廣泛。該法由于操作簡單,成本較低,較短時間內(nèi)能檢測大量樣本(每次檢測時間約20分鐘),特別適合在果蔬生產(chǎn)基地和蔬菜批發(fā)市場使用。我站新引進(jìn)"NC一800"農(nóng)藥殘留快速測定儀,就是利用生物體內(nèi)提取液進(jìn)行生化反應(yīng)來判斷是否存在農(nóng)藥殘留及污染的情況。此項工作開展1年來,檢測準(zhǔn)確率高、效果好,群眾很受歡迎。
一、工作原理
在一定條件下,有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥能抑制乙酰膽堿酶的活性,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān),加入反應(yīng)試劑——酶后,應(yīng)用分光光度法測定吸光值隨時間的變化值計算出抑制率,來判斷農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)。
二、操作步驟
1.樣品提取取2克蔬菜樣品(葉菜類要剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取1厘米左右的表皮樣品)放入三角瓶中,用專用移液器,加入10毫升緩沖液振蕩2分鐘后倒入放有過濾紙的三角瓶上,濾出的液體即為待測試報。
2.樣品測試在1厘米的比色皿中,加入酶100微升,然后加入待測試液2.5毫升,搖勻,靜置10分鐘后,再加入顯色劑100微升,然后加底物20微升,搖勻后馬上放入測定儀,按“樣品測量”鍵,1分鐘后,數(shù)據(jù)結(jié)果馬上可打印出來(可貯存3000條數(shù)據(jù))。由于測定儀有6個樣品通道,可同時測6個樣品。
3.結(jié)果判斷樣品的抑制率在40%~50%之間,為懷疑農(nóng)藥含量超標(biāo),為求數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性,最好重做1次;或用氣相色譜法進(jìn)一步確認(rèn),若抑制率大于50%即為農(nóng)藥超標(biāo)。
三、注意事項
1.磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水,否則影響準(zhǔn)確性。
2.酶試劑及底物要在0~5℃溫度條件下保存,以確保酶的活性,因此,應(yīng)在冰箱中保存,但不能凍至結(jié)冰。
3.微量移液器要專用,貼上標(biāo)簽,避免交叉使用造成試劑污染;試劑從試劑瓶吸出后,不能再放回瓶中,堅持只吸不進(jìn)的原則,防止試劑污染。
4.樣品測試的最后一道程序,即加底物后,應(yīng)馬上搖勻,放入測定儀,否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。經(jīng)實踐,在菠菜樣品的測試中,立刻放入的抑制率為21.4%,1分鐘后放入的51.7%,可見,加試劑后放入時間的長短可影響其準(zhǔn)確性。
5.韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。因此.,處理這類樣品時,可采取整株蔬菜浸出提取液的方法(不要搞爛樣品)。對葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取類似方法。
6.該法只是定性檢測法,只能檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,不適用于其它類型農(nóng)藥的檢測。
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